Diacetat de fluoresceïna(FDA), amb la fórmula molecular C24H16O7, número CAS 596-09-8, pes molecular 416.380, sol aparèixer com una pols de color groc clar amb bona cristal·linitat. La solubilitat en acetona és relativament alta, arribant fins a 25 mg/ml. Tanmateix, hi ha informació limitada sobre la seva solubilitat en altres dissolvents, però generalment es creu que la seva solubilitat es veu afectada per la polaritat i la temperatura del dissolvent. És un compost lipòfil que pot penetrar a la membrana cel·lular de les cèl·lules vives i hidrolitzar-se com a substrat esterasa per produir fluoresceïna fluorescent. Aquesta característica fa que sigui àmpliament aplicable en camps com ara la detecció de la viabilitat cel·lular, la detecció microbiana i l'avaluació de l'activitat enzimàtica. No emet llum en si mateix, però la fluoresceïna produïda per hidròlisi a les cèl·lules vives pot emetre fluorescència verda. Les seves longituds d'ona d'excitació i emissió són de 488 nm i 530 nm, respectivament, la qual cosa la converteix en una sonda fluorescent d'ús habitual en citometria de flux i altres instruments de detecció biològica.
|
|
|
|
Fórmula química |
C24H16O7 |
|
Missa exacta |
416 |
|
Pes molecular |
416 |
|
m/z |
416 (100.0%), 417 (26.0%), 418 (2.7%), 418 (1.4%) |
|
Anàlisi elemental |
C, 69.23; H, 3.87; O, 26.90 |
Diacetat de fluoresceïna(FDA) és una substància química àmpliament utilitzada en biologia, medicina, vigilància ambiental i camps industrials.
Biologia i investigació mèdica
1. Viabilitat cel·lular i detecció d'activitat
(1) Anàlisi de citometria de flux: com a substrat de l'esterasa, pot entrar a les cèl·lules vives a través de la membrana cel·lular i ser hidrolitzat en fluoresceïna per esterases dins de les cèl·lules, emetent fluorescència verda. Per tant, sovint s'utilitza en citometria de flux per detectar la viabilitat cel·lular i avaluar l'estat de supervivència de les cèl·lules mesurant la intensitat de la fluorescència.
(2) Avaluació de la citotoxicitat: en els estudis de citotoxicitat, es pot utilitzar per avaluar els efectes de fàrmacs, productes químics, etc. sobre l'activitat cel·lular. Comparant els canvis en la intensitat de fluorescència de les cèl·lules abans i després del tractament, es pot determinar si aquestes substàncies tenen efectes tòxics sobre les cèl·lules.
2. Detecció i identificació microbiana
(1) Detecció d'activitat microbiana: es pot utilitzar per detectar l'activitat microbiana al medi ambient, com ara l'activitat microbiana total al sòl. Mitjançant la mesura de la intensitat de fluorescència produïda per la hidròlisi de la FDA per microorganismes, es pot avaluar el nivell d'activitat dels microorganismes.
(2) Detecció de bacteris i virus: en investigació biològica i mèdica, també es pot utilitzar per detectar la presència de bacteris i virus. Mitjançant tècniques específiques de tinció o etiquetatge, es pot aconseguir una ràpida identificació i recompte de bacteris i virus.
3. Biomarcadors i detecció d'activitat enzimàtica
(1) Avaluació de l'activitat enzimàtica: es pot utilitzar com a substrat per a diversos enzims per avaluar la seva activitat. Per exemple, pot servir com a substrat fluorescent per a la glutatió S-transferasa Pi humana (hGTP1-1), i la seva activitat es pot avaluar mesurant la intensitat de la fluorescència.
(2) Detecció de biomarcadors: en el diagnòstic de malalties, es pot utilitzar per detectar la presència i el nivell de determinats biomarcadors, com ara marcadors de cèl·lules canceroses. El diagnòstic precoç i el seguiment del tractament de les malalties es poden aconseguir mitjançant mètodes de detecció específics.
Seguiment ambiental
1. Seguiment de la qualitat de l'aigua
(1) Detecció de microorganismes a l'aigua: es pot utilitzar per detectar microorganismes a l'aigua, com ara quists de Giardia vius. Mitjançant la mesura de la intensitat de fluorescència produïda per la hidròlisi de la FDA per microorganismes en mostres d'aigua, es pot avaluar la contaminació microbiana de la qualitat de l'aigua.
(2) Avaluació de la vitalitat de les algues: en el seguiment ambiental, també es pot utilitzar per avaluar l'estat de vitalitat de les algues a les masses d'aigua.
Mitjançant la mesura de la capacitat d'absorció i conversió de les cèl·lules d'algues cap a la FDA, es pot determinar l'estat de creixement i la qualitat de l'entorn ecològic de les algues.
2. Seguiment del sòl
Activitat microbiana del sòl: com s'ha esmentat anteriorment, es pot utilitzar per mesurar l'activitat microbiana total al sòl. Això és de gran importància per avaluar l'estat de salut i el nivell de fertilitat dels ecosistemes del sòl.
Aplicacions industrials
1. Equips LED
Material fluorescent: es pot utilitzar com a material fluorescent en dispositius LED per convertir i ajustar el color de la llum absorbint la llum emesa pel LED i emetent diferents colors de fluorescència.
2. Marcatge d'oli
Agent d'etiquetatge fluorescent: a la indústria del petroli, es pot utilitzar com a agent d'etiquetatge fluorescent. En afegir-lo als productes derivats del petroli per donar-los propietats fluorescents, facilita la identificació i localització en els processos de detecció, seguiment i recuperació de fuites.
Altres aplicacions
1. Detecció de temperatura en investigació mèdica
Sonda sensible a la temperatura: les propietats de fluorescència són sensibles a la temperatura, per tant, es pot utilitzar com a sonda sensible a la temperatura en investigació mèdica. Mitjançant la mesura dels canvis en la intensitat de la fluorescència, es pot aconseguir-un seguiment en temps real dels canvis de temperatura a l'entorn in vivo o in vitro.
2. Tractament de les malalties isquèmiques
Tractament de la isquèmia: els estudis han demostrat que es pot utilitzar per tractar malalties isquèmiques en determinades situacions. Mitjançant el seu mecanisme bioquímic específic, pot afavorir la recuperació i reparació dels teixits isquèmics.
La síntesi dediacetat de fluoresceïna(FDA) és un procés químic complex però important, i els seus productes tenen àmplies aplicacions en biologia, medicina, vigilància ambiental i altres camps.
La síntesi de la FDA es basa normalment en la fluoresceïna o els seus compostos precursors, que introdueixen grups d'àcid acètic mitjançant reaccions d'esterificació. La reacció d'esterificació és una reacció de síntesi orgànica d'ús habitual, que normalment implica la reacció d'àcid carboxílic i alcohol en presència d'un catalitzador àcid per produir èsters. En síntesi, la fluoresceïna o el seu precursor (com la diacetilfluoresceïna) reacciona amb l'anhídrid acètic per produir la substància.
1. Preparació de la matèria primera
Fluoresceïna:
Com a material de partida, la fluoresceïna es pot sintetitzar o comprar mitjançant diversos mètodes.
Anhídrid acètic:
Com a agent acilant en reaccions d'esterificació, cal garantir la puresa i l'estabilitat.
Catalitzadors:
Com la piridina i l'àcid sulfúric, s'utilitzen per promoure reaccions d'esterificació.
dissolvent:
Com l'etanol anhidre, el DMSO, etc., utilitzats per dissoldre reactius i productes, afavoreixen el progrés uniforme de la reacció.
2. Reacció d'esterificació
(1) Condicions de reacció:
Normalment es realitza a una determinada temperatura (com ara 90-120 graus C) i pressió per garantir una barreja i reacció completa dels reactius.
(2) Passos de funcionament:
Dissoleu la fluoresceïna en una quantitat adequada de dissolvent, afegiu anhídrid acètic i catalitzador, remeneu-ho uniformement i, a continuació, escalfeu i reflux durant un període de temps (com ara diverses hores). Es requereix un seguiment continu del progrés de la reacció durant el procés de reacció per garantir una reacció completa.
(3) Processament posterior:
Un cop completada la reacció, el producte brut s'obté mitjançant passos com ara filtració, rentat i assecat. A continuació, es va realitzar la purificació mitjançant mètodes com la recristal·lització i la cromatografia en columna per obtenir una FDA d'alta -puresa.
3. Exemples específics de síntesi
(1) Preparació de fluoresceïna:
En primer lloc, la fluoresceïna es prepara mitjançant una sèrie de reaccions químiques. Aquest procés pot incloure passos com la fusió, l'addició de clorur de zinc, la reacció, la solidificació, el refredament, el tractament àcid, el rentat, l'assecat, etc.
(2) Reacció d'esterificació:
Agafeu una certa quantitat de fluoresceïna (com ara 6,3 g, uns 0,02 mol), afegiu una quantitat adequada d'anhídrid acètic (com 16 ml, unes 5 vegades la quantitat teòrica) i catalitzador (com la piridina), escalfeu-lo a una temperatura determinada (com ara 90 graus C) en un bany d'oli, remeneu i barregeu uniformement. A continuació, augmenta gradualment la temperatura a una temperatura més alta (com ara 120 graus C) i reacciona durant un període de temps (com ara 7 hores).
(3) Processament posterior:
Un cop completada la reacció, refredar naturalment a temperatura ambient i filtrar per obtenir el producte cru. Rentar i assecar el producte brut per obtenir el producte acabat.
Funcionament segur:
Durant el procés de síntesi, hi intervenen substàncies químiques tòxiques i nocives com l'anhídrid acètic i la piridina. Cal operar en una campana de fums i portar un equip de protecció adequat (com ara ulleres de protecció, bata de laboratori, guants, etc.).
Control de les condicions de reacció:
La reacció d'esterificació és sensible a la temperatura, la pressió, el temps de reacció i altres condicions, i es requereix un control estricte per garantir una reacció suau i la qualitat del producte.
Passos de purificació:
Els passos de purificació durant el post-processament són crucials per obtenir productes d'alta-puresa. Cal triar un mètode de purificació adequat segons la situació real i dur a terme un tractament suficient de rentat i assecat.
Per tal de millorar l'eficiència de la síntesi i la puresa del producte, es pot optimitzar el mètode de síntesi. Per exemple:
(1) Millora dels catalitzadors:
L'elecció dels catalitzadors adequats pot augmentar la velocitat i el rendiment de les reaccions d'esterificació.
(2) Optimització de les condicions de reacció:
Ajustant la temperatura de reacció, la pressió, el temps i altres condicions, es poden millorar encara més la puresa i el rendiment del producte.
(3) Millora dels mètodes de purificació:
L'adopció de mètodes de purificació més eficients (com ara la separació cromatogràfica, la separació de membrana, etc.) pot millorar la puresa i la taxa de recuperació delDiacetat de fluoresceïna.
Quins són els efectes secundaris d'aquesta substància?
Proves de viabilitat cel·lular:
La FDA s'utilitza àmpliament per a les proves de viabilitat cel·lular perquè pot entrar en cèl·lules vives i descompondre's dins de les cèl·lules per produir fluorescència, cosa que permet una avaluació visual de l'estat de viabilitat de la cèl·lula.
Baixa toxicitat:
A concentracions d'ús normals, la FDA té una baixa toxicitat per a les cèl·lules i normalment no té efectes negatius significatius sobre les cèl·lules.
Dany cel·lular:
Si la concentració de FDA és massa alta o el temps de processament és massa llarg, pot causar certs danys a les cèl·lules. Això pot ser degut a l'impacte de la FDA o els seus productes de descomposició sobre la permeabilitat de les membranes cel·lulars o el metabolisme intern de les cèl·lules.
Reaccions al·lèrgiques:
Per a determinades persones, la FDA pot causar reaccions al·lèrgiques. Aquesta reacció sol estar relacionada amb la constitució d'un individu i l'estat del sistema immunitari, però la probabilitat d'ocurrència és relativament baixa.
Contaminació ambiental:
La FDA ha de manejar-lo correctament després de l'ús per evitar la contaminació potencial del medi ambient i l'ecosistema.
Tot i que la pròpia FDA no és una substància química altament perillosa, la manipulació inadequada de qualsevol substància química pot tenir un impacte negatiu en el medi ambient.
Control de concentració:
Quan s'utilitza la FDA per a proves de viabilitat cel·lular, la concentració i el temps de processament s'han de controlar estrictament per evitar danys innecessaris a les cèl·lules.
Protecció personal:
Els operadors han de portar equips de protecció personal adequats, com ara guants, màscares i ulleres de protecció quan utilitzen la FDA per evitar el contacte directe amb la pell, els ulls o les vies respiratòries.
Eliminació de residus:
Després de l'ús, les solucions de la FDA s'han d'eliminar adequadament d'acord amb les normatives pertinents per garantir que no causen contaminació al medi ambient.
Preguntes freqüents
Què és el diacetat de fluoresceïna?
El diacetat de fluoresceïna (FDA) es defineix comun èster d'àcids grassos que esdevé fluorescent després de la hidròlisi enzimàtica per acetiltransferases en cèl·lules micobacterianes vives, permetent la identificació de bacils viables en assajos de viabilitat.
Per a què serveix la fluoresceïna?
S'utilitza la injecció de fluoresceïnaper ajudar a determinades parts de l'ull (per exemple, la retina, l'iris) a ser més visibles durant els procediments mèdics oculars. Aquest medicament només l'ha d'administrar o sota la supervisió directa del vostre metge. Aquest producte està disponible en les següents formes de dosificació: Solució.
Què és l'anàlisi del diacetat de fluoresceïna?
El diacetat de fluoresceïna (FDA) ésS'utilitza per determinar l'activitat microbiana. La determinació d'aquesta activitat es pot dur a terme en el marc de diversos objectes d'estudi utilitzant terra, escombraries, torba, etc. Aquest mètode es basa en una reacció d'hidròlisi de conversió de diacetat de fluoresceïna (FDA) en fluoresceïna.
Etiquetes populars: diacetat de fluoresceïna cas 596-09-8, proveïdors, fabricants, fàbrica, venda a l'engròs, compra, preu, a granel, a la venda