Iptg en polses pot utilitzar per al lloc d'acció de l'anestèsia local, s'aplica com a agent d'escampament per alleujar el-dolor de la ferida postoperatòria i el dolor de l'úlcera. Els reactius biològics moleculars utilitzats habitualment en el cribratge de taques blaves i blanques i l'expressió de proteïnes induïdes per IPTG en bacteris. IPTG, nom complet isopropil- - D-tiogalactoside, CAS 367-93-1, fórmula molecular C9H18O5S, pes molecular 384,37 Daltons, pertany a compostos de molècules petites. Pols blanca o gairebé blanca, amb baixa solubilitat en aigua però millor solubilitat en dissolvents orgànics. Hi ha grups iònics a les molècules, de manera que tenen un cert grau de conductivitat a l'aigua. Estable a temperatura ambient, però fàcil de descompondre en condicions d'alta temperatura o àcids i àlcalis forts. No hi ha olor evident, però es pot emetre una lleugera olor de compostos orgànics durant l'ús. És un inductor d'ús comú que s'utilitza per induir l'expressió de proteïnes en bacteris. En el diagnòstic mèdic, IPTG pot servir com a sonda fluorescent o agent cromogènic per detectar molècules o teixits específics en mostres. En combinar-se amb molècules diana, IPTG pot generar senyals fluorescents o canvis de color, proporcionant un fort suport per al diagnòstic de malalties.
|
Morfològic |
Pols cristal·lina |
|
Color |
Blanc |
|
Punt de fusió |
105 graus C |
|
Punt d'ebullició |
350,9 graus C (estimació aproximada) |
|
Densitat |
1,3329 (estimació aproximada) |
|
Condicions d'emmagatzematge |
2-8 graus C |
|
alcohol de solubilitat |
soluble soluble 40 parts de dissolvent |
|
Coeficient d'acidesa (pKa) |
13,00 ± 0,70 (predit) |
|
Soluble en aigua |
50 mg/ml |
|
Punt d'inflamació |
197,8 graus |
|
Solubilitat |
1.6g/l |
|
Densitat de vapor |
5.21 (contra aire) |
|
Índex de refracció |
1,5060 (estimació) |
|
|
|
Iptg en pols,Paràmetres físics, Mp. : 114 ~ 121 graus C , Descripció d'ús , Reactius de biologia molecular comuns, utilitzats habitualment en el cribratge blau-blanc i l'expressió de proteïnes induïda per IPTG-en bacteris. , Especificacions d'embalatge , 1G, 5G, 25G, 100G, 1KG , Condicions d'emmagatzematge
Refrigerat 2-8 graus, protegit de la llum, Descripció del perill, Codi de perill: Xi, Nivell de risc: R36/37/38, Nivell de seguretat: S23-24/25-36.
L'IPTG s'utilitza habitualment en experiments de clonació que necessiten induir activitat -galactosidasa. Sovint s'utilitza en combinació amb X-Gal o Bluo-Gal per a la detecció en blanc-blau de colònies bacterianes recombinants, que Chemicalbook pot induir per expressar l'operó lac a E. coli. L'IPTG s'uneix a la proteïna repressora lacI i canvia la seva conformació per evitar la inhibició del gen lacZ codificat per la -galactosidasa.
IPTG, nom complet isopropil- -D-tiogalactoside és un inductor d'ús comú que s'utilitza àmpliament per induir i regular l'expressió de proteïnes. A causa de la seva estructura i funció úniques, IPTG normalment es prepara utilitzantIptg en polsMètodes de síntesi al laboratori.
Ruta sintètica
1. Síntesi de glicòsids:
Primera síntesi El -D-tiogalactoside se sol sintetitzar pel mètode de síntesi de glucòsids, mitjançant la condensació de la galactosa amb les bases corresponents (com ara l'isopropil). Aquest pas requereix l'ús de grups protectors per evitar la generació de subproductes-en les reaccions posteriors.
2. Reacció de fosforilació:
A partir de la síntesi de glicòsids, els grups fosfat s'introdueixen mitjançant la reacció de fosforilació per obtenir l'èster 5'-fosfat del grup isopropil- -D-tiogalactoside-. Aquest pas requereix l'ús de fosfats i anhídrids o àcids corresponents.
3. Grup de desprotecció:
Mitjançant la reacció del grup de desprotecció, el grup protector del glucòsid s'elimina per obtenir el producte objectiu isopropil- - D-tiogalactoside. Aquest pas requereix l'ús d'una solució àcida o alcalina per facilitar la reacció.
Passos experimentals:
Preparar reactius i instruments:
Preparar els sucres, bases, grups protectors, fosfats, anhídrids o àcids necessaris, dissolvents i altres reactius, així com els instruments experimentals necessaris com agitadors, termòmetres, espectrofotòmetres, etc.
Síntesi de glucòsids:
Escalfar i remenar la galactosa amb les bases corresponents en un dissolvent, afegir un catalitzador i promoure la reacció de condensació. Aquest pas requereix un control estricte de la temperatura i del temps d'agitació per garantir el bon progrés de la reacció.
Reacció de fosforilació:
Els glicòsids sintetitzats s'escalfen i s'agiten amb fosfat, anhídrid o àcid en un dissolvent, i s'afegeix un catalitzador per promoure la reacció de fosforilació. Aquest pas requereix controlar la temperatura i el temps d'agitació, prestant atenció a la polaritat i dosificació del dissolvent per garantir el progrés de la reacció i la generació del producte.
Grup de desprotecció:
Traieu el grup protector del producte de fosforilació en una solució àcida o alcalina per obtenir el producte objectiu isopropil- - D-tiogalactoside. Aquest pas requereix controlar el valor del pH i la temperatura, prestant atenció a la polaritat i dosificació del dissolvent per garantir el progrés de la reacció i la generació del producte.
Separació i purificació:
El producte objectiu es separa de la barreja de reacció mitjançant cromatografia en columna, recristal·lització i altres mètodes de separació i purificació. Aquest pas requereix atenció a les condicions de funcionament com ara la temperatura, la dosificació del dissolvent, el cabal, etc. per garantir la puresa i el rendiment del producte.
Anàlisi i identificació:
La identificació estructural del producte objectiu es realitza mitjançant mètodes analítics com la ressonància magnètica nuclear i l'espectrometria de masses. Aquest pas requereix l'ús dels instruments, equips i mitjans tècnics corresponents per confirmar l'estructura i la puresa del producte.
Iptg en polsnom complet isopropil- - D-tiogalactoside és un inductor d'ús comú molt utilitzat per induir i regular l'expressió de proteïnes.
1. Inducció de l'expressió de proteïnes:
IPTG té un paper important en la inducció de l'expressió de proteïnes. És un inductor molt utilitzat que pot induir de manera eficient l'expressió de gens específics en bacteris, obtenint així la proteïna diana desitjada en un curt període de temps. El seu mecanisme d'acció és unir-se al gen lacI dels bacteris, inhibir l'activitat de la seva proteïna reguladora de la transcripció, obrir així l'operó lac dels bacteris i iniciar l'expressió dels gens diana. Quan s'utilitzen operons de lactosa com a promotors per a l'expressió de proteïnes, es requereixen inductors i l'IPTG pot actuar com a anàleg de la lactosa per induir l'expressió de galactosidasa a Escherichia coli. Les cèl·lules no poden utilitzar-lo per aconseguir una expressió sostinguda. IPTG s'uneix a lac|productes, provocant canvis conformacionals lluny de lacO, activant així la transcripció. Aquesta regulació transcripcional inductible s'ha convertit en un element d'ús habitual en la construcció de vectors del sistema d'expressió d'E. coli.
2. Regulació de l'expressió gènica:
IPTG té un paper important en la regulació de l'expressió gènica. Com a reactiu experimental important, té un paper important en la regulació de l'expressió gènica i els experiments de sobreexpressió de proteïnes. Controlant el temps d'addició i la concentració d'IPTG, es pot aconseguir la regulació de l'expressió de la proteïna diana. Aquest efecte regulador es basa en la unió d'IPTG a lac|productes en operons de lactosa, alterant la seva conformació, deixant així lacO i activant encara més la transcripció. Aquest mecanisme de regulació transcripcional inductible fa que l'IPTG sigui de gran importància en camps d'investigació com la funció gènica, les interaccions de proteïnes i el cribratge de fàrmacs.
3. Cristalització de proteïnes:
En els experiments de cristal·lització de proteïnes, IPTG s'utilitza com a inductor per promoure la cristal·lització de proteïnes. El seu mecanisme d'acció és canviar la conformació de les proteïnes unint-se a regions hidrofòbiques de les proteïnes, promovent així l'agregació i la cristal·lització entre les molècules de proteïnes. Aquest procés d'agregació i cristal·lització és reversible, de manera que la cristal·lització de proteïnes es pot induir afegint IPTG, o els cristalls de proteïnes es poden dissoldre eliminant IPTG.
En els experiments de cristal·lització de proteïnes, normalment s'afegeix IPTG a la solució de proteïnes com a concentració final d'1 mM. Aquesta baixa concentració d'IPTG pot evitar una inducció excessiva de proteïnes, aconseguint així millors efectes de cristal·lització. Al mateix temps, IPTG també pot servir com a chaperona molecular per ajudar en el plegament i l'agregació correctes de proteïnes, obtenint així cristalls de proteïnes més uniformes.
Cal tenir en compte que l'IPTG no afavoreix la cristal·lització de proteïnes en tots els casos. Algunes proteïnes no són sensibles a IPTG, o a causa de la seva estructura i propietats inherents que no són adequades per a la cristal·lització, es necessiten validacions i optimitzacions experimentals per a diferents proteïnes per determinar les condicions i mètodes òptims de cristal·lització.
Reaccions adverses
Citotoxicitat
Toxicitat per a les cèl·lules procariotes
Tot i que l'IPTG s'utilitza habitualment per induir l'expressió gènica a les cèl·lules procariotes, les altes concentracions d'IPTG poden tenir efectes tòxics sobre les cèl·lules procariotes. La investigació ha demostrat que quan la concentració d'IPTG és massa alta, pot interferir amb els processos metabòlics normals dins de les cèl·lules. Per exemple, pot afectar el metabolisme energètic de les cèl·lules, interferir amb vies com la glucòlisi i el cicle de l'àcid tricarboxílic, provocant una disminució de la producció intracel·lular d'ATP i afectant el creixement i la proliferació cel·lular. A més, altes concentracions d'IPTG també poden danyar la integritat de la membrana cel·lular, augmentar la seva permeabilitat, provocar fuites de substàncies intracel·lulars i permetre que substàncies nocives de l'entorn extracel·lular entrin a la cèl·lula, provocant així la mort cel·lular. Els experiments han trobat que quan Escherichia coli es cultiva en un medi que conté altes concentracions d'IPTG, la velocitat de creixement dels bacteris s'alenteix significativament i el nombre de bacteris viables disminueix gradualment amb l'allargament del temps de cultiu. Això indica que altes concentracions d'IPTG tenen un cert efecte inhibidor i mata sobre Escherichia coli.
Toxicitat per a les cèl·lules eucariotes
A més de les cèl·lules procariotes, IPTG també pot ser tòxic per a les cèl·lules eucariotes. Hi ha certes diferències d'estructura i funció entre les cèl·lules eucariotes i les cèl·lules procariotes, però IPTG encara pot afectar les funcions fisiològiques normals de les cèl·lules eucariotes a través de diverses vies. D'una banda, IPTG pot interferir amb les vies de transducció del senyal dins de les cèl·lules eucariotes. La transducció del senyal a les cèl·lules té un paper regulador crucial en processos com el creixement, la diferenciació i l'apoptosi. IPTG pot alterar la intensitat i la direcció de la transducció del senyal mitjançant la interacció amb determinades molècules de senyalització dins de les cèl·lules, afectant així les activitats fisiològiques normals de les cèl·lules.
Toxicitat per a les cèl·lules eucariotes
D'altra banda, IPTG pot induir una resposta a l'estrès oxidatiu a les cèl·lules eucariotes. L'estrès oxidatiu es refereix a un desequilibri entre l'oxidació intracel·lular i l'activitat antioxidant, que condueix a un augment de la producció d'espècies reactives d'oxigen (ROS). L'excés de ROS pot atacar biomolècules com l'ADN, les proteïnes i els lípids dins de la cèl·lula, causant danys cel·lulars i deteriorament funcional. La investigació ha trobat que, sota determinades condicions, el tractament amb IPTG de cèl·lules eucariotes augmenta significativament els nivells intracel·lulars de ROS, acompanyat d'una disminució de la viabilitat cel·lular i un augment de la taxa d'apoptosi. Això suggereix que l'IPTG pot induir una resposta a l'estrès oxidatiu i exercir toxicitat sobre les cèl·lules eucariotes.
Etiquetes populars: pols iptg cas 367-93-1, proveïdors, fabricants, fàbrica, venda a l'engròs, compra, preu, a granel, a la venda