Tampó BIS-TRIS CAS 6976-37-0

És un tampó biològic eficient amb un rang efectiu d'amortització del pH de 5,8-7,2 i un valor de pKa de 6,5 (25 graus). En experiments bioquímics, moltes biomolècules com les proteïnes i els àcids nucleics són molt sensibles als valors de pH, i fins i tot petits canvis de pH poden afectar la seva estructura i funció. BIS-TRIS pot estabilitzar el valor de pH de la solució dins d'aquest rang de pH, proporcionant un entorn estable per a les reaccions bioquímiques. En el procés de separació i purificació de proteïnes, es pot mantenir la conformació natural de la proteïna per evitar la desnaturalització o la precipitació a causa dels canvis de pH.

Per exemple, en tècniques de purificació de proteïnes com la cromatografia d'intercanvi iònic i la cromatografia d'afinitat, l'ús deBuffer BIS-TRISpot assegurar que la interacció entre proteïnes i medis de cromatografia es produeix en condicions de pH estables, millorant així l'eficiència i la puresa de la purificació.

En els assajos d'activitat enzimàtica, l'activitat enzimàtica sovint depèn d'un entorn de pH específic. El valor de pH del sistema de reacció es pot controlar amb precisió per permetre que l'enzim exerceixi activitat catalítica en condicions de pH òptimes, mesurant així amb precisió l'activitat de l'enzim. Això és de gran importància per estudiar les propietats, els mecanismes d'acció i el desenvolupament de preparacions enzimàtiques dels enzims.

BIS-TRIS té la capacitat de coordinar-se amb diversos ions metàl·lics i formar complexos estables, com ara Zn ² ⁺ - BIS-TRIS, Mn ² ⁺ - BIS-TRIS, etc. Aquests complexos d'ions metàl·lics tenen un paper important en l'estudi de l'estructura i funció de les biomolècules metàl·liques sovint actuen com a anàlisi estructural de proteïnes. cofactors per participar en la formació de centres actius en proteïnes. En coordinar BIS-TRIS amb ions metàl·lics, es pot estabilitzar l'estructura dels complexos d'ions metàl·lics proteics, facilitant l'ús de tècniques com ara la cristal·lografia de raigs X{- i la ressonància magnètica nuclear (RMN) per a l'anàlisi estructural.

Per exemple, els centres actius de certs enzims que contenen zinc requereixen ions de zinc per mantenir la seva activitat catalítica, i els complexos BIS-TRIS Zn ² ⁺ poden proporcionar un entorn estructural estable per a aquests enzims, que ajuda a analitzar amb precisió les seves estructures tridimensionals.

En la investigació d'àcids nucleics com la seqüenciació de l'ADN, els ions metàl·lics també poden estar implicats en el plegament i la regulació funcional dels àcids nucleics. La coordinació entre el BIS-TRIS i els ions metàl·lics pot regular l'entorn local dels àcids nucleics, afectant les interaccions entre els àcids nucleics i les proteïnes, les molècules petites, etc., proporcionant una eina poderosa per a-investigacions en profunditat sobre l'estructura i la funció dels àcids nucleics.

BIS-TRIS té aplicacions importants en experiments d'electroforesi de proteïnes. SDS-PAGE (electroforesi en gel de poliacrilamida de dodecil sulfat de sodi) i Native PAGE (electroforesi en gel de poliacrilamida no desnaturalitzant) són tècniques habituals d'electroforesi de proteïnes.Buffer BIS-TRISs'utilitza sovint per preparar el tampó d'electroforesi per mantenir l'estabilitat del pH de la solució durant l'electroforesi. A la SDS-PAGE, les proteïnes es desnaturalitzen i es carreguen negativament en un tampó de mostra que conté SDS i mercaptoetanol, i després se separen per mida molecular en gel de poliacrilamida.

Pot garantir l'estabilitat del valor de pH del tampó d'electroforesi, permetent que les proteïnes migrin de la manera esperada en un camp elèctric, separant així amb precisió proteïnes de diferents pesos moleculars i detectant els seus pesos moleculars relatius.

A Native PAGE, les proteïnes mantenen la seva conformació natural per a la separació electroforètica. El seu ús pot prevenir la desnaturalització de proteïnes a causa dels canvis de pH, preservar l'activitat natural i la informació conformacional de les proteïnes i ajudar a estudiar l'estat natural i les interaccions de les proteïnes.

Western blotting és una tècnica experimental important utilitzada per detectar el nivell d'expressió de proteïnes diana. El tampó de propà Bis Tris s'utilitza sovint com a tampó de transport de proteïnes en experiments d'immunoblot.

Durant la transferència de proteïnes del gel a la membrana, el tampó de propà Bis Tris pot mantenir un ambient de pH estable, assegurant que la proteïna es transfereixi a la membrana amb la conformació i l'estat de càrrega correctes. Això és crucial per a la posterior unió d'anticossos i detecció del senyal.

Si les proteïnes pateixen desnaturalització o canvis conformacionals durant el procés de transferència, pot ser que els anticossos no puguin reconèixer amb precisió la proteïna objectiu, afectant així la precisió dels resultats experimentals. Per tant, el tampó de propà Bis Tris té un paper crucial en els experiments d'immunoblotting, ajudant a millorar la sensibilitat i la fiabilitat dels experiments.

El cultiu cel·lular és una tecnologia important en la investigació biomèdica i el valor del pH del medi de cultiu cel·lular té un impacte significatiu en el creixement i el metabolisme cel·lular. El tampó de propà BIS-TRIS es pot utilitzar per a la preparació de medis de cultiu cel·lular per mantenir un valor de pH estable durant el procés de cultiu cel·lular.

Els diferents tipus de cèl·lules tenen requisits de pH diferents, però generalment requereixen creixement en un entorn proper al pH fisiològic (aproximadament 7,2-7,4).

El tampó de propà BIS-TRIS pot amortiguar els canvis de pH del medi de cultiu durant el cultiu cel·lular, prevenir les fluctuacions de pH causades per l'acumulació de productes metabòlics, l'intercanvi de gasos i altres factors i proporcionar un entorn de creixement estable per a les cèl·lules. Això és de gran importància per al creixement normal, la proliferació i l'expressió funcional de les cèl·lules, ajudant a millorar la taxa d'èxit del cultiu cel·lular i la fiabilitat dels resultats experimentals.

L'electroforesi d'àcids nucleics és un mètode d'ús habitual per detectar la longitud i la concentració dels àcids nucleics diana, inclosa l'electroforesi d'ADN i ARN. Adequat per a experiments d'electroforesi d'àcids nucleics, pot mantenir l'estabilitat del pH del tampó d'electroforesi.

En l'electroforesi d'àcid nucleic, les molècules d'àcid nucleic migren sota l'acció d'un camp elèctric en funció de la seva mida i propietats de càrrega.

Pot garantir l'estabilitat del valor de pH de la solució durant l'electroforesi, permetent que les molècules d'àcid nucleic migrin de la manera esperada, separant així amb precisió els fragments d'àcid nucleic de diferents longituds i detectant-ne les concentracions. Això és de gran importància per a investigacions com la clonació de gens, l'anàlisi de l'expressió gènica i la seqüenciació d'àcids nucleics.

BIS-TRIS també es pot utilitzar per detectar la creatina quinasa. La creatina cinasa és un enzim important que juga un paper crucial en el metabolisme energètic muscular. La determinació de la seva activitat és de gran importància per al diagnòstic de malalties musculars i l'avaluació de les lesions esportives. En l'experiment de detecció de la creatina cinasa, es pot mantenir l'estabilitat del pH del sistema de reacció per garantir que l'enzim mostri activitat catalítica en condicions de pH òptimes. Controlant amb precisió el valor del pH, es pot millorar la precisió i la fiabilitat de la mesura de l'activitat de la creatina cinasa, proporcionant un fort suport per al diagnòstic i la investigació clínica.

BIS-TRIS també té un paper important en la investigació i l'aplicació de l'hemoglobina. Durant el procés de separació de l'hemoglobina, es pot mantenir la seva estabilitat i activitat per evitar la desnaturalització o l'agregació a causa dels canvis de pH. Això és de gran importància per a la purificació i la investigació estructural de l'hemoglobina.

BIS-TRIS pot protegir eficaçment l'hemoglobina durant el procés de liofilització-. La liofilització és un mètode d'ús habitual per conservar productes biològics, però les proteïnes es poden danyar durant el procés de congelació i assecat. Pot proporcionar un entorn estable per a l'hemoglobina durant el procés de liofilització-, reduir la desnaturalització i la inactivació de proteïnes i millorar l'activitat i l'estabilitat de l'hemoglobina després de la liofilització-.

L'IEF (electroforesi de focalització isoelèctrica) i l'electroforesi en gel 2-D són tècniques habituals en la investigació de proteòmica, que s'utilitzen per separar i analitzar mescles de proteïnes complexes. BIS-TRIS es pot utilitzar com a electròlit càtode per a l'electroforesi en gel IEF/2-D.

Durant el procés IEF, les proteïnes migren i se centren en un gradient de pH basat en el seu punt isoelèctric. El catòlit BIS-TRIS pot mantenir l'estabilitat del pH del tampó d'electroforesi, assegurant que les proteïnes puguin migrar amb precisió al seu punt isoelèctric durant el procés d'enfocament isoelèctric. En l'electroforesi en gel 2-D, l'ús deBuffer BIS-TRIStambé ajuda a millorar l'efecte de separació i la resolució de les proteïnes, proporcionant dades d'alta{0}}qualitat per a la investigació en proteòmica.