Isotiocianat de fluoresceïnavermell taronja, isotiocianat fluorescent groc, isotiocianat fluorescent vermell, isotiocianat fluoresceïna isòmer I, 5- isothiocianat L’anticòs després de la unió no perd l’especificitat d’unió amb certs antigen . Encara té una forta fluorescència verda en la solució alcalina . Després d’afegir àcid, precipita, i la fluorescència desapareix . és lleugerament soluble en acetona, here i petroli .}}}}}}}}}}}} Reactiu bioquímic, així com un medicament diagnòstic mèdic, que pot diagnosticar ràpidament malalties causades per bacteris, virus, paràsits, etc. ., a més, es pot unir amb diverses proteïnes d’anticossos i l’anticòs després d’unió no perd l’especificitat de la unió amb certs antigen, i encara hi ha una fluorescència verda forta en la solució alcalina precipita i la fluorescència desapareix, i és lleugerament soluble en acetona, èter i petroli èter .
|
Fórmula química |
C21H11NO5S |
|
Massa exacta |
389 |
|
Pes molecular |
389 |
|
m/z |
389 (100.0%), 390 (22.7%), 391 (4.5%), 391 (2.5%), 391 (1.0%), 392 (1.0%) |
|
Anàlisi elemental |
C, 64.78; H, 2.85; N, 3.60; O, 20.54; S, 8.23 |
|
|
|
Estudi sobre les propietats deisotiocianat de fluoresceïnaInsulina etiquetada per a la gelatina aminada i la seva aplicació a l'administració de la mucosa nasal:
Sota la condició d’emulsionant extern, la solució aquosa de gelatina aminada es va dispersar en oli d’oliva i es va preparar un nou tipus de microsfores de gel carregades positivament, microsfores de gelatina aminada, μ m . La mida es distribueix uniformement . Les microsfores seques poden absorbir unes 20 vegades del seu propi pes d’aigua per formar hidrogels . Solució, i el potencial ZATA en aigua destil·lada és de 41 . 5 mV.
Amb l’augment de la concentració de glutaraldehid o l’extensió del temps de reacció de reticulació, el contingut d’amino de microsfores va disminuir ., però, independentment de les condicions de reacció de reticulació, les microsfores de gelatina aminades preparades per aquest mètode tenen un contingut d’amino primari més elevat que les microsferes de gelatina . aminotrades microsfèries de gelatina aminotrada per l’atropella ràpidament (<1h) in the presence of trypsin, but slowly (>20h) en la pepsina i el medi àcid-base . La interacció entre les microsfores de gelatina aminades i la mucina és més forta que la entre microsfores de gelatina . La densitat de càrrega positiva de les microsfores de gelatina aminada és el principal motiu de la seva forta interacció amb mucina .} els bioDhisius adequats de les aminades de les aminades de la mucina.}}}}}}}}}. Les microsfores de gelatina es van estudiar mitjançant el mètode d’etiquetatge de fluorescència i la tecnologia de degradació de l’enzim in vitro, utilitzant el model de rentat de perfusió gàstrica de rata aïllada i experiment in vivo en rates .
Els resultats van mostrar que en les mateixes condicions experimentals, el nombre de microsfores de gelatina aminades conservades a l’estómac de rata aïllada era més que el de les microsfores de gelatina, i el tipus de solució de reg (el suc gàstric artificial o el tampó de fosfat humà de PH7) no va tenir cap efecte significatiu en la retenció gastrica de microsferes, que va indicar que la interacció elèctrica entre els microsfers i el gastric Mucus no va ser el factor decisiu per a la retenció gàstrica de microsfores en aquest model . Tanmateix, a l'experiment, es va trobar que la quantitat de microsfores de gelatina aminada es va conservar a la rata aïllada estómac de la rata L'adhesió de les microsfores de gelatina aminada podria estar afectada pel contingut d'amino a la superfície de les microsfores o el grau de reticulació .
Els resultats experimentals in vivo en rates van demostrar que les microsfores de gelatina amino tenien una adhesió mucosa millor que les microsfores de gelatina . Els efectes de la gelatina aminada en l’absorció nasal de glucan i insulina es van investigar en rates sanes . els resultats van mostrar que 0 . 2% (wn) ( La gelatina podria promoure significativament l’absorció de la fluoresceïna isotiocianat glucan de la mucosa nasal de rata amb una biodisponibilitat de 23 . 8%. Després de l'administració intranasal de 10 tampons de fosfat d'insulina IU que contenien 0 2% (p/v) amino gelatina, el nivell de glucosa en sang era significativament inferior al del tampó de fosfat d'insulina.
Isotiocianat de fluoresceïna(FITC), com a reactiu d’etiquetatge fluorescent clàssic, s’ha convertit en una eina indispensable en els camps de la biologia, la medicina i la ciència de materials a causa del seu alt rendiment quàntic, una excel·lent fotostabilitat i una bona biocompatibilitat .
El grup isotiocianat (- n=c=s) de FITC pot patir reaccions covalents amb grups actius com ara grups amino i tiol en biomolècules, formant complexos d'etiquetatge fluorescent estables . Aquesta característica la converteix en el reactiu preferit per a la proteïna, l'àcid nucleic i el peptid i el peèptid Etiquetatge .
Etiquetatge de proteïnes i investigació funcional
FITC aconsegueix un etiquetatge específic en unir -se a residus de lisina de proteïnes com anticossos i lectines ., per exemple, en experiments d’immunofluorescència, els anticossos marcats en FITC poden unir -se a antígens superficials cel·lulars i analitzar quantitativament els nivells d’expressió d’antigen mitjançant la microscòpia de fluorescència o el citometi de flux .}}}}}} mostren que les dades experimentals mostren que les dades experimentals mostren que les dades experimentals mostren que que les dades experimentals mostren que les dades experimentals mostren que les dades experimentals mostren que que les dades experimentals mostren que que les dades experimentals mostren que les dades experimentals mostren que les dades experimentals mostren que les dades experimentals mostren que les dades experimentals mostren que les dades experimentals mostren que les dades experimentals mostren que les dades experimentals mostren que les dades experimentals La intensitat de fluorescència del conjugat FITC IgG està relacionada linealment amb la concentració de l'antigen i la sensibilitat de detecció pot arribar al nivell Danak . A més, les proteïnes etiquetades amb FITC també es poden utilitzar per a estudis d'interacció proteïna, com ara l'anàlisi de canvis conformacionals de proteïnes mitjançant la tecnologia de transferència de ressonància de la fluorescència (FRET).
Etiquetatge d’àcids nucleics i hibridació molecular
El FITC es pot modificar químicament per etiquetar el final de 5 'o 3' dels àcids nucleics per a la fluorescència hibridació in situ (FISH) Tecnologia . en la investigació contra el càncer, les sondes etiquetades FITC poden unir -se específicament a regions anormals cromosòmiques per ajudar en el diagnòstic de malalties hematològiques com la leucèmia i el limfoma . per exemple, per exemple, FitC signals per exemple, FitC per exemple, per exemple, FitC, FitC. Els gens de fusió BCR-Abl poden mostrar senyals fluorescents grocs en nuclis de cèl·lules interfase amb una taxa de precisió superior al 95%.
Etiquetatge de pèptids i lliurament de medicaments
Els pèptids etiquetats amb FITC tenen un paper important en els sistemes de lliurament de medicaments . prenent m2pep-fitc Com a exemple, aquesta molècula es compon d'un pèptid orientada M2PEP i un grup fluorescent FITC Els teixits tumorals són 3 . 2 vegades el dels fàrmacs lliures, millorant significativament l'eficàcia terapèutica i reduint els efectes secundaris.
Les propietats de fluorescència de FITC la converteixen en el "estàndard d'or" en el camp dels diagnòstics in vitro, àmpliament utilitzats en tècniques com la immunocromatografia, la citometria de flux i ELISA .
Detecció ràpida de patògens
Es poden utilitzar anticossos etiquetats FITC per al diagnòstic ràpid d'infeccions bacterianes, virals i paràsites ., per exemple, en el diagnòstic de la malària, els anticossos anti -malària marcats en FITC s'uneixen a la sang del pacient, i el senyal de fluorescència verda del paràsit IS observat a través de microscòpies de fluorescència de fluorescència {1} Mètodes a 15 minuts i la sensibilitat arriba al 98%., a més, també es poden utilitzar sondes d’àcid nucleic marcades FITC per detectar àcids nucleics de virus respiratoris, com el gen ORF1AB de SARS-CoV -2, amb una especificitat de 99 . 2%.
Marcadors del tumor
En citometria de flux,isotiocianat de la fuesceïnaEls anticossos anti-CD45 etiquetats poden distingir les cèl·lules de leucèmia de les cèl·lules sanguínies normals . Les dades mostren que la taxa positiva de l'anticòs CD34 marcat amb FITC en el diagnòstic de leucèmia mieloide aguda (CTC) La tecnologia de detecció pot capturar cèl·lules tumorals en concentracions extremadament baixes en sang perifèrica, proporcionant un nou mètode per al diagnòstic precoç de tumors sòlids com el càncer de mama i el càncer de pulmó .
Diagnòstic de malalties autoimmunes
En la tecnologia ELISA, es poden utilitzar autoanticossos etiquetats amb FITC (com ara anticossos anti-nuclears i anticossos d'ADN de doble cadena)) per al diagnòstic de malalties com els experiments de lupus sistèmic lupus eritematos (SLE) . han demostrat que FITC-ElISA té una sensibilitat del 92% i una especificitat del 95% per a la detecció de en la detecció de l'anti-sm per detectar l'antico per a la detecció en en el 92% del 92% i una especificitat del 95% per a la detecció en en el 92% i una especificitat del 95%. Els anticossos, que són significativament millors que els mètodes d’immunofluorescència tradicionals .
La permeabilitat cel·lular i la baixa toxicitat de FITC la converteixen en una eina ideal per a la imatge cel·lular, àmpliament utilitzada en la localització orgànica, l'observació de la divisió cel·lular i la investigació d'apoptosi .
Etiquetatge orgànul cel·lular i observació dinàmica
Les sondes mitocondrials marcades FITC (com el MitoTracker Green) es poden unir específicament al potencial de membrana mitocondrial i monitor A més, també es pot utilitzar les sondes de lisosoma etiquetades amb FITC (LysoTracker Green) per estudiar processos d'autofagia, quantificant el nombre d'autofagosomes mitjançant canvis en la intensitat de fluorescència .
Anàlisi del cicle cel·lular i de l’apoptosi
In flow cytometry, FITC labeled propidium iodide (PI) can bind to DNA and distinguish different stages of the cell cycle (G0/G1, S, G2/M) by fluorescence intensity. Experimental data shows that the sensitivity of FITC-PI double staining method for detecting cell apoptosis is 98%, which is 30% higher than the traditional trypan Mètode de tinció blava . A més, les sondes annexina Vitc marcades per FITC es poden unir específicament a la fosfatidilserina exposada a la superfície de les cèl·lules apoptòtiques, aconseguint la identificació precisa de cèl·lules apoptòtiques primerenques .
Recerca sobre migració i invasió cel·lular
En els experiments Transwell, les cèl·lules marcades amb FITC poden supervisar el procés de migració en temps real ., per exemple, en l'estudi de la metàstasi del tumor, la taxa de migració de cèl·lules de càncer de mama etiquetades amb FITC (MCF -7) a través de la cola de la matriu està positivament correlacionada amb la capacitat d'invasió, proporcionant indicadors quantitatius per a la projecció de la projecció de la projecció de la projecció de la projecció de la projecció de la projecció de la projecció de la projecció de la projecció de la projecció de la projecció de la projecció en en els indicadors de la projecció de la projecció. fàrmacs .
FITC juga múltiples funcions en el desenvolupament de fàrmacs, inclosa la validació de l'objectiu, l'avaluació del sistema de lliurament de fàrmacs i els estudis farmacocinètics .
Validació objectiu i mecanisme de recerca en accions
Els inhibidors de molècules petites etiquetades FITC es poden utilitzar per validar els objectius del fàrmac ., per exemple, els inhibidors de EGFR etiquetats amb FITC (com el gefitinib) poden demostrar la unió de fàrmacs a receptors EGFR a la superfície de les cèl·lules tumorals, quantificar l’afinitat d’unió (valor KD) mitjançant la intensitat de fluorescència .} Estudi de l'eficiència de silenciament del gen, proporcionant una base per a la teràpia d'interferència d'ARN .
Avaluació del sistema de lliurament de medicaments
Les nanopartícules etiquetades amb FITC (com els liposomes i les microsfores de polímer) poden supervisar la distribució i alliberar el comportament dels fàrmacs in vivo en temps real .
Els experiments han demostrat que l’acumulació de liposomes PEGilats amb etiquetats FITC en els teixits tumorals és 2 . 8 vegades la dels fàrmacs lliures, i el senyal de fluorescència pot durar 24 hores, proporcionant dades visuals per optimitzar els sistemes de lliurament de fàrmacs.
Estudis farmacocinètics i toxicològics
Les molècules de fàrmacs etiquetades amb FITC es poden analitzar quantitativament per a la seva absorció, distribució, metabolisme i processos d’excreció (ADME) in vivo mitjançant la tecnologia d’imatge de fluorescència . per exemple, la intensitat de fluorescència dels antibiòtics etiquetats FITC La dosi . A més, els assajos de citotoxicitat etiquetats amb FITC també poden avaluar el dany dels fàrmacs a les cèl·lules normals i guiar les avaluacions de seguretat .
Les característiques de resposta de fluorescència de FITC fan que sigui aplicable exclusivament en el camp de la ciència dels materials, inclòs el desenvolupament de sensors de pH, sensors de temperatura i sondes d’ions metàl·lics .
Sensor de fluorescència sensible per pH
La intensitat de fluorescència deisotiocianat de fluoresceïna is significantly affected by the pH value of the solution. In weakly acidic environments (pH 5.0-6.5), protonation of FITC groups leads to increased fluorescence intensity; Under alkaline conditions (pH>8 {. 0), la fluorescència es redueix . basada en aquesta característica, les nanopartícules modificades FITC es poden utilitzar per controlar les fluctuacions intracel·lulars àcid-base ., per exemple diagnòstic.
Sonda fluorescent sensible a la temperatura
La vida de fluorescència de FITC canvia amb la temperatura . en condicions de baixa temperatura (4 graus), la vida fluorescència de microsfores de polímer etiquetades FITC s’estén a 5 . 2 nanosegons, que és 1 {{6} 8 vegades superior a la temperatura ambient (25 graus). Aquesta característica la converteix en una eina ideal per estudiar processos de transició de fase i criopreservació cel·lular.
Sonda de detecció d’ions metàl·lics
FITC redueix significativament la intensitat de la fluorescència quan es combina amb ions metàl·lics com Cu ² ⁺ i Hg ² ⁺, fent -lo adequat per al control ambiental ., per exemple, les nanopartícules de gel de sílice modificades FITC Espectroscòpia.
L’aplicació de FITC al camp agrícola s’està expandint gradualment, incloent la detecció de virus vegetals, el diagnòstic de malalties dels animals i la identificació de la puresa de varietats .
Detecció ràpida de virus vegetals
Els anticossos de virus marcats amb FITC es poden utilitzar per detectar virus de mosaic de tabac (TMV), virus de mosaic de cogom (CMV) i altres virus . han demostrat que la sensibilitat del FITC-ELISA per detectar TMV és 0 . 1 ng/ml, que és 10 vegades més gran que la serològica tradicional Mètodes . A més, també es poden utilitzar sondes d’àcid nucleic marcades FITC per detectar gens exògens en cultius modificats genèticament, com ara gens BT resistents als insectes.
Diagnòstic de malalties animals
Els anticossos marcats amb FITC es poden utilitzar per detectar el virus de la febre porcina (CSFV), el virus de la grip aviària (AIV) i altres virus .
En el diagnòstic de la febre porcina, els anticossos anti -csfV marcats amb FITC s’uneixen a les seccions de teixit i observeu la distribució de virus mitjançant la microscòpia de fluorescència, reduint el temps de detecció de mètodes tradicionals de 3 dies a 6 hores . A més, també es pot utilitzar citometria de flux de FITC.
Identificació de puresa de varietats
Les sondes d’ADN marcades amb FITC es poden utilitzar per identificar la puresa de les varietats de cultiu . Per exemple, la sonda FITC dirigida a la resistència a la malaltia de la explosió d’arròs pot distingir amb precisió entre els homozigots i els heterozigots en les llavors d’arròs híbrides, amb una precisió d’identificació de puresa de 99 .} 5%.}}} Els marcadors moleculars SSR marcats amb FITC també es poden utilitzar per a l’anàlisi de la diversitat genètica de les races ramaderes i d’aviram, proporcionant una base científica per a la cria.
La síntesi de FITC: 4- anhidrur nitrofthalic (vegeu C8H3NO5, [5466-84-2])) reacciona amb el resorcinol a 195-200 graus C per a 10h, ciclitza en una barreja de 3 'nitrofluorescina Anhidrur, hidrolises amb solució d’etanol d’hidròxid de sodi saturat, 4 "Nitrofluoresceïna s’obté . Aleshores 4’ - nitrofluorescein es dissol en aigua d’amoníac, reacciona amb níquel rexhlet i hidrazina hidrats a la temperatura de la sala durant 2 hores i es redueix a 4 ” fluorescein . El més radical és acilitzat i eliminat per obtenirisotiocianat de fluoresceïna.
El producte pur pura és la pols cristal·lina de color groc o taronja, que és fàcilment soluble en aigua i dissolvent alcohòlic . Hi ha dos isòmers, entre els quals el tipus I isòmer és millor en eficiència, estabilitat i proteïna Unió . El pes molecular de FitC és 389 . 4, la longitud d'absorció màxim La longitud d’ona d’emissió màxima és de 520 ~ 530 nm, que mostra una fluorescència verda brillant . FITC es pot emmagatzemar durant molts anys en llocs freds, foscos i secs, i és la fluoresceïna més àmpliament utilitzada . El seu avantatge principal és que l’ull humà és més sensible al verd groc i la fluorescència verda en el exemplar de secció és generalment menys que el vermell.
Etiquetes populars: Fluorescein Isothiocianate CAS 27072-45-3, proveïdors, fabricants, fàbrica, a l'engròs, compra, preu, a granel, a la venda