Bremelanotida(enllaç:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/bremelanotide-powder-cas-189691-06-3.html) és una hormona polipeptídica sintètica l'estructura de la qual és similar a la leptina, la tirosina i la melanina de la pell que existeixen de manera natural al cos humà. Com a nou tipus de fàrmac, Bremelanotide té una funció reguladora i s'utilitza sovint en el tractament de la disfunció erèctil i la baixa libido. Els escenaris d'ús a la vida diària són cada cop més extensos. Amb la recerca en profunditat de la gent sobre ell, la gent ha descobert molts tipus dels seus mètodes de síntesi, que s'analitzaran un per un a continuació.
1. Sintetitzat a partir de L-tirosina:
En el mètode de síntesi original, l'estructura de Bremelanotide es va obtenir deformant la L-tirosina. En primer lloc, la L-tirosina es converteix en dipeptidil-L-tirosina (Boc-Tyr(OCO)2-OH) en presència d'àcid fluorhídric, on Boc representa el grup succinimidometil (t -butoxicarbonil). A continuació, afegiu alcohol benzílic (PhCH2OH), 1-(3-dietilaminopropoxi){-2-({2-metazolil)etan (EDC) i N-hidroxibutandiol en reactius de tetrahidrofurà (THF) com la imida (HOBt) pot combinar dipeptidil-L-tirosina amb pseudopèptid alanina (Phe-Aib-Aib-Lys(Ac)-Gly-Lys(Ac)-Aib-Leu-NH2) es va sintetitzar en Bremelanotide.
(1) Conversió de L-tirosina a dipeptidil-L-tirosina:
Primer, dissol la L-tirosina en aigua i afegiu la quantitat adequada d'àcid fluorhídric. Normalment, la concentració de L-tirosina és 1M i la quantitat d'àcid fluorhídric és de 5-10%. La mescla es va deixar reposar a 0-4 graus durant 1 hora i després es va apagar.
A continuació, el complex L-tirosina-àcid fluorhídric obtingut es va afegir gota a gota al tetrahidrofurà. Al mateix temps, es va afegir una quantitat adequada de reactius de reacció com alcohol benzílic, EDC i HOBt al tetrahidrofurà. Després de reposar durant 2 hores sota agitació, es pot obtenir dipeptidil-L-tirosina (Boc-Tyr(OCO)2-OH).
(2) Reacció de la dipeptidil-L-tirosina amb el pseudopèptid alanina:
Dissoleu la dipeptidil-L-tirosina obtinguda en N,N-dimetilformamida (DMF) i afegiu-hi el pseudopèptid alanina. Les condicions de reacció inclouen la temperatura, el temps de reacció i la concentració de reactius, etc. Aquests factors afectaran el rendiment i la puresa del producte. A una concentració de 225 g/L, la proporció de Boc-Tyr(OCO)2-OH a pseudopèptid alanina era d'1:30.
Després d'agitar i deixar reposar en -N,N-dimetilformamida durant 24 hores, la solució de reacció es va abocar en aigua amb gel i es va precipitar amb una solució d'aldehid àcid. El resultat és el producte final de Bremelanotide.
El mètode de síntesi té principalment els següents avantatges: alta puresa del producte i procés de producció senzill. Però aquest mètode també té alguns desavantatges, com ara consumeix temps, cost elevat, etc.
2. Síntesi en fase sòlida:
La síntesi en fase sòlida és actualment un dels mètodes sintètics més utilitzats per a Bremelanotide, i també és un mètode sintètic important en el camp de la síntesi de pèptids. En els mètodes en fase sòlida, les cadenes polipeptídiques es construeixen mitjançant addicions successives d'unitats d'aminoàcids. En primer lloc, la primera unitat d'aminoàcids es modifica en un grup protector de N estèricament restrictiu i no degradable (com Fmoc), que després s'uneix al medi porós. A continuació, introduint el grup protector de l'àcid acrílic, la reacció d'acilació i altres passos, s'afegeix cada unitat d'aminoàcid al medi porós i es construeix gradualment una cadena polipeptídica completa. Finalment, en els passos d'eliminació del grup N-protector, desnitrificació, etc., es pot preparar una cadena polipeptídica de Bremelanotide amb una seqüència específica.
El mètode de síntesi en fase sòlida té principalment els següents avantatges: alta eficiència i alta taxa d'utilització de matèries primeres. Però aquest mètode sintètic també té alguns inconvenients, com ara que es requereixen múltiples passos d'assecat i rentat en el procés de producció, i aquests passos provocaran una disminució de la qualitat del producte.
3. Síntesi en fase líquida:
La síntesi en fase líquida és un altre mètode de síntesi de Bremelanotide, que es realitza mitjançant un sistema de reacció líquida. Els passos principals del mètode de síntesi inclouen la selecció de matèries primeres, el disseny de molècules de fàrmacs, la selecció de la ruta de síntesi, la reacció, la purificació i similars. En comparació amb la síntesi en fase sòlida, el mètode de síntesi en fase líquida pot obtenir Bremelanotide amb major puresa i activitat biològica. En el mètode de síntesi en fase líquida, els reactius de reacció més utilitzats són el dihidroxietil mercaptan (EDT), l'agent etoxicarbonilant (EEDQ), el clorur de tioacetil, etc.
El mètode de síntesi en fase líquida té principalment els següents avantatges: funcionament senzill i alta puresa del producte. Tanmateix, aquest mètode de síntesi també té alguns desavantatges, com ara un període de síntesi més llarg i un cost més elevat.
4. Síntesi fisicoquímica:
En el mètode de síntesi fisicoquímica, Bremelanotide es sintetitza mitjançant mètodes físics i químics. Aquest mètode té principalment dos enfocaments diferents: un és realitzar la síntesi de Bremelanotide mitjançant operacions repetides de transformació en fase sòlid-líquid; l'altra és promoure l'autoassemblatge i la polimerització de cadenes polipeptídiques mitjançant la compressió física i mecànica, sintetitzant així Bremelanotide.
Mecanisme de reacció:
La síntesi de Bremelanotide es fa principalment convertint la L-tirosina en acilat L-fenòlic, després sintetitzant l'acilat i pseudopèptid L-fenòlic i, finalment, obtenint el producte. El mecanisme de la reacció és el següent:
(1) Conversió de L-tirosina en L-fenol acilat:
La L-tirosina reacciona amb l'azida de sodi en solució de THF per generar L-fenol acilat. L'azida de sodi convertirà el grup hidroxil de la tirosina en un grup azida, i després el tractament àcid convertirà el grup azida en un acilat fenòlic.
(2) L'acilat de L-fenol es converteix en clorur àcid:
L'acilat L-fenòlic reacciona amb el clorur d'acetil en THF per produir clorur àcid. Cinc vegades la quantitat de TBHS és per absorbir l'HCl generat. Els clorurs d'àcids són intermedis de reacció que són necessaris per a les reaccions posteriors.
(3) Síntesi de clorur àcid i pseudopèptid:
El clorur àcid intermedi reacciona amb el pseudopèptid del DMF per generar la cadena polipeptídica de Bremelanotide. El que passa en aquest pas és una reacció de condensació d'anhídrid, en la qual HOBt és el catalitzador.
(4) Purificació i anàlisi del producte:
També cal purificar i analitzar el producte final per garantir la puresa i la qualitat del compost.
El mètode de síntesi fisicoquímic té principalment els següents avantatges: funcionament senzill i període de preparació curt. Tanmateix, aquest mètode sintètic també té alguns inconvenients, com ara la baixa puresa del producte i la diversitat insuficient del producte.
En conclusió, els mètodes de síntesi de Bremelanotide són diversos i flexibles, i la selecció depèn de molts factors, com ara les condicions de reacció, el cost de la síntesi i el temps de reacció, etc. Independentment del mètode utilitzat, les condicions de reacció estables i els productes d'alta puresa són els principals claus per a la síntesi reeixida de Bremelanotide.