Epitaló(enllaç: https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/epitalon-powder-cas-307297-39-8}.html) és una molècula peptídica, que es considera que té una bona activitat biològica i un potencial valor medicinal. Actualment, la investigació del pèptid epitalon se centra principalment en la seva aplicació com a agent anti-envelliment.
L'epitalon pot allargar la longitud dels telòmers als extrems dels cromosomes activant la telomerasa, afectant així positivament la proliferació i regeneració de les cèl·lules mare. Els estudis han demostrat que Epitalon pot inhibir significativament l'estrès oxidatiu nociu, reduir el dany a l'ADN i regular l'expressió del factor de creixement semblant a la insulina-1 (IGF-1) i, finalment, aconseguir l'efecte de reduir la velocitat de envelliment i allargar la vida útil.
A més, Epitalon també té efectes immunomoduladors i neuroprotectors. Epitalon pot millorar la immunitat humana i promoure el reconeixement i l'eliminació del cos d'antígens heterogenis i propis. A més, Epitalon també pot reduir la mort de les cèl·lules neuronals i la neurodegeneració, aconseguint així efectes neuroprotectors. Epitalon també té efectes anticancerígens i exerceix els seus efectes mitjançant la regulació del cicle cel·lular, la promoció de l'apoptosi cel·lular i la inhibició de la proliferació de cèl·lules tumorals.
|
|
|
Epitalon és un potenciador corporal, un compost polipeptídic format per quatre aminoàcids alanina (Ala), àcid glutàmic (Glu), asparagina (Asp) i lisina (Lys). Els mètodes de síntesi d'Epitalon es divideixen principalment en síntesi química i biosíntesi.
Mètode de síntesi química:
Epitalon és un pèptid format per quatre aminoàcids amb la fórmula molecular C14H22N4O9. Epitalon pot promoure l'alliberament de l'hormona del creixement humà, ajudant així a retardar l'envelliment, millorar el son i millorar la immunitat.
1. Preparació de reactius:
Els reactius per a la síntesi d'Epitalon inclouen quatre aminoàcids, alanina (Ala), àcid glutàmic (Glu), asparagina (Asp) i lisina (Lys), així com reactius acilants com Boc-Lys-OtBu i Asp (OtBu) 2 i així successivament. La puresa d'aquests aminoàcids i reactius ha de ser superior al 99 per cent, en cas contrari la qualitat del producte es veurà afectada.
2. Etapes de la síntesi química
2.1 Síntesi d'alanina-4-anhídrid hidroxibutíric (Ala-Hyp):
First, mix alanine (Ala) and 4-hydroxybutyric anhydride (Hyp-OtBu), and carry out acylation reaction with an activator such as DCC, EDC, etc. under anhydrous environment to generate alanine-4-hydroxybutyric anhydride (Ala-Hyp). The final product was white crystals with >95 per cent de puresa.
2.2 Síntesi d'Ala-Hyp-Glu-OtBu:
The synthesized alanine-4-hydroxybutyric anhydride and glutamic acid-butyrate (Glu-OtBu) were mixed in proportion, and then underwent multiple condensation reactions in anhydrous environment to obtain Ala-Hyp-Glu-OtBu. The final product is a white powder with a purity >95 per cent
2.3 Síntesi d'Epitalon:
Afegiu Asp(OtBu)2 i Boc-Lys-OtBu al sistema de reacció de condensació en l'ordre dissenyat per endavant, i sotmeteu a múltiples reaccions de condensació per obtenir Epitalon. El procés és el següent:
a. Reacció del grup de desprotecció:
Primer, es va desprotegir l'Asp (OtBu) 2 i es va eliminar el grup protector d'Asp (OtBu) 2 mitjançant hidròxid de sodi (NaOH) i àcid tricloroacètic (TCA) per generar unitats estructurals Asp i alliberar BuOt alhora. El temps de reacció va ser d'1 hora i la temperatura era la temperatura ambient. Després de la reacció, realitzeu una neutralització àcid-base, afegiu una gran quantitat de solució saturada de clorur de sodi, precipiteu amb etanol i assequeu al buit per obtenir Asp com un sòlid blanc.
b. Reacció de condensació:
Afegiu Asp i Ala-Hyp-Glu-OtBu al sistema de reacció de condensació i, a continuació, realitzeu múltiples reaccions de condensació per obtenir Epitalon. Aquest procés s'ha de fer mitjançant diferents tractaments.
El primer pas: eliminar el grup protector Ala-Hyp:
Primer, es va dissoldre Ala-Hyp-Glu-OtBu en metanol, es va afegir àcid tricloroacètic (TCA) i aigua per eliminar el grup protector Hyp-OtBu utilitzat per protegir el grup amino per generar Ala-Hyp-Glu-OH. La reacció s'ha de dur a terme a temperatura ambient i la solució de reacció es tracta amb NaOH després de la reacció per neutralitzar l'acidesa.
El segon pas: eliminar el grup protector Glu-OtBu:
Després, després d'un assecat a fons, es va barrejar Ala-Hyp-Glu-OH amb Boc-Lys-OtBu, es va tornar a afegir àcid tricloroacètic i aigua i la reacció es va realitzar a temperatura ambient. Aquesta reacció elimina el grup protector Glu-OtBu per generar Ala-Hyp-Glu-Lys (Boc)-OtBu.
El tercer pas: eliminar el grup protector Lys:
Finalment, afegir àcid tricloroacètic, aigua i metanol elimina el grup protector Boc-Lys-OtBu per generar Epitalon. La reacció s'ha de dur a terme a temperatura ambient i la solució de reacció es tracta amb NaOH després de la reacció per neutralitzar l'acidesa.
3. Anàlisi de resultats:
Finalment s'obté el producte Epitalon, que es pot caracteritzar i purificar per diferents mètodes analítics. Per exemple, es poden determinar paràmetres com la puresa, les impureses i el pes mitjançant mètodes de purificació com la Farmacopea Europea (EP) o la Farmacopea dels Estats Units (USP).
4. Resum:
Epitalon és un reforç corporal compost pels quatre aminoàcids alanina, àcid glutàmic, asparagina i lisina. El mètode de síntesi química d'Epitalon inclou principalment el mètode de síntesi en fase sòlida i el mètode de síntesi en fase líquida, que necessiten enllaçar diversos aminoàcids mitjançant reaccions de diversos passos. Aquest procés requereix un control acurat de les condicions de reacció i tècniques de purificació per garantir productes d'alta puresa.
Mètode biosintètic:
El mètode de biosíntesi consisteix a utilitzar la biocatàlisi de microorganismes o enzims sintètics per preparar Epitalon, incloent la fermentació i la catàlisi enzimàtica.
1. Mètode de fermentació: El mètode de fermentació és un mètode biosintètic que utilitza el microorganisme transgènic Escherichia coli per expressar Epitalon. Primer, poseu la seqüència del gen Epitalon a Escherichia coli i cultiu-la en massa per a l'expressió. Després, s'utilitzen diverses tècniques de purificació com la cromatografia d'intercanvi iònic i la cromatografia en gel per obtenir finalment productes purs. Els passos específics són els següents:
1.1 Seleccioneu el bacteri hoste adequat:
Per sintetitzar Epitalon, cal seleccionar una soca hoste adequada per a l'expressió. Els bacteris hostes utilitzats habitualment inclouen Escherichia coli (Escherichia coli), llevats (Saccharomyces cerevisiae) i fongs (Aspergillus oryzae). En seleccionar els bacteris hostes, cal considerar si els bacteris hostes tenen la capacitat de sintetitzar proteïnes de manera eficient, si poden plegar i modificar proteïnes correctament i si poden produir productes objectiu d'alt rendiment.
1.2 Disseny de la seqüència gènica i el clon:
Després de seleccionar els bacteris hoste, la seqüència del gen Epitalon (incloent seqüències d'alanina, àcid glutàmic, asparagina i bases de lisina) s'ha d'inserir al bacteri hoste mitjançant la tecnologia de recombinació d'ADN. Normalment, la seqüència gènica es clona en un vector d'expressió que inclou elements com ara seqüències promotores i terminadores i un marcador antibiòtic seleccionable.
1.3 Expressió i purificació:
Un cop finalitzada la clonació, el vector d'expressió es transforma en el bacteri hoste i després es cultiva. Durant el procés de cultiu, el bacteri hoste sintetitzarà Epitalon segons la seqüència gènica del vector d'expressió. Un cop produït el producte en quantitat suficient, es pot aïllar de les cèl·lules mitjançant diferents mètodes de purificació i s'obté Epitalon d'alta puresa.
2. Mètode catalitzat per enzims: el mètode catalitzat per enzims consisteix a sintetitzar Epitalon enllaçant diferents aminoàcids amb diversos enzims. Per exemple, la L-glutamat-5-aminasa s'utilitza per catalitzar la reacció del glutamat i el butirat per sintetitzar Glu-OtBu. A continuació, utilitzeu L-asparaginasa per catalitzar la reacció de condensació de l'asparagina i Ala-Hyp-Glu-OtBu per obtenir Epitalon.
Els mètodes de síntesi d'Epitalon es divideixen principalment en síntesi química i biosíntesi. La síntesi química és actualment el mètode de síntesi Epitalon més utilitzat. La biosíntesi consisteix a preparar Epitalon mitjançant la biocatàlisi de microorganismes o enzims sintètics, inclosa la fermentació i la catàlisi enzimàtica. Tot i que els mètodes biosintètics tenen un gran potencial, encara calen més investigacions i optimitzacions. Epitalon és un fàrmac potencial amb àmplies perspectives d'aplicació, que es pot utilitzar en els camps de l'anti-envelliment, la regulació immune, la neuroprotecció i el tractament del càncer. Al mateix temps, Epitalon també es pot utilitzar com a aliment saludable i producte de cura de la salut per ajudar els consumidors a resistir l'envelliment, millorar la immunitat i reduir el risc de malalties. Tot i que la investigació sobre Epitalon encara està en la seva infància, es creu que amb la investigació en profunditat sobre el seu mecanisme i funció, Epitalon es convertirà en un producte important de medicina i cura de la salut.