GLP-1(enllaç:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/glp-1-peptide-cas-87805-34-3.html) consta de dues cadenes polipeptídiques interconnectades: una cadena peptídica amb 21 residus d'aminoàcids a l'extrem N-terminal (GLP-1[7-27]) i una cadena peptídica amb 30 residus d'aminoàcids a la C- terminal (GLP-1 [28-58]), hi ha un pont de condensació entre les cadenes. La fórmula química de GLP-1 és C165H264N50O55S2, la massa molar és d'uns 3,8 kDa i el CAS 87805-34-3. L'estat de càrrega de GLP-1 canvia amb el pH. Quan el pH és inferior al punt isoelèctric del GLP-1, el GLP-1 està carregat positivament; quan el pH és més gran que el punt isoelèctric, el GLP-1 està carregat negativament. En condicions fisiològiques, el GLP-1 sol tenir una càrrega negativa. Té una forta sensibilitat redox i sensibilitat a la proteasa. En condicions fisiològiques, el GLP-1 sovint s'hidrolitzen ràpidament per proteases com la tripsina, perdent així la seva activitat biològica. A més, l'energia tèrmica, el pH, els ions metàl·lics i altres factors també afectaran l'estabilitat del GLP-1. Per millorar l'estabilitat del GLP-1, els investigadors solen utilitzar diversos mètodes per millorar-lo, com ara la modificació química i l'ajust de l'estructura molecular.
Punt isoelèctric:
El GLP-1 és una hormona polipeptídica amb un punt isoelèctric (pI) d'aproximadament 5,1. El punt isoelèctric és el valor de pH al qual hi ha igual nombre d'ions carregats positivament i negativament en una solució particular. Quan una substància es troba en el seu punt isoelèctric, no té càrrega neta, de manera que no estarà sotmesa a forces electroforètiques en un camp elèctric i, per tant, no es mourà cap a cap dels pols.
Com que el punt isoelèctric del GLP-1 és inferior al valor del pH de l'entorn fisiològic, es carregarà positivament in vivo. Aquestes propietats permeten que GLP-1 passi ràpidament a través de la membrana cel·lular a través d'alguns transportadors moleculars, com el receptor GLP-1 (GLP-1R) i s'uneixi a GLP-1R a la cèl·lula, exercint així les seves diferents funcions fisiològiques. El punt isoelèctric de GLP-1 és aproximadament 5,9, és a dir, quan està a pH=5,9, el nombre de càrrega de la molècula de pèptids GLP-1 amb càrrega neta és zero. Això vol dir que en diferents condicions de pH, l'estat de càrrega del GLP-1 també canviarà, afectant així la seva activitat biològica a l'organisme.
A més del punt isoelèctric, el GLP-1 també té altres propietats físiques i químiques i característiques estructurals, com ara el pes molecular, la seqüència d'aminoàcids, la configuració espacial, la hidrofilicitat, la solubilitat, etc. Aquestes propietats físiques i químiques i característiques estructurals són de gran importància per al funcionament i la funció de GLP-1 in vivo, i també són aspectes clau per a la investigació i l'aplicació de GLP-1.
càrrec:
El GLP-1 és una hormona polipeptídica. La seva estructura molecular conté dos residus d'aminoàcids naturals, cisteïna i leucina. Aquests residus poden experimentar reaccions d'oxidació per formar enllaços disulfur (enllaços SS) en condicions específiques. Afectant així les propietats de càrrega de GLP-1.
En un entorn fisiològic, el GLP-1 sol presentar una propietat de càrrega positiva. Això es deu al fet que el seu punt isoelèctric és d'uns 5,1, que és més baix que l'entorn fisiològic amb un valor de pH de 7,4, la qual cosa fa que el grup amina al seu N-terminal estigui parcialment protonat. fer que tota la molècula estigui carregada positivament. En aquest cas, GLP-1 pot entrar i combinar ràpidament amb GLP-1R a la cèl·lula a través d'alguns transportadors, com el receptor GLP{-1 (GLP-1R) i exercir una varietat de funcions fisiològiques. L'estat de càrrega de GLP-1 canvia amb el pH. Quan el pH és inferior al punt isoelèctric de GLP-1, GLP-1 està carregat positivament; quan el pH és més gran que el punt isoelèctric, el GLP-1 està carregat negativament. En condicions fisiològiques, el GLP-1 sol tenir una càrrega negativa.
Tanmateix, en determinades circumstàncies, l'enllaç SS de GLP-1 es pot reduir, fent que perdi la seva càrrega positiva i assumeixi un estat de càrrega neta o propietats de càrrega negativa. Al laboratori, aquesta reacció de reducció pot ser promoguda per un agent reductor com el DTT (àcid ditiotreònic), canviant així l'estat de càrrega del GLP-1.
En conclusió, l'estat de càrrega del GLP-1 es veu afectat per molts factors, com ara el seu punt isoelèctric, els grups funcionals químics de la molècula i les condicions ambientals externes. Aquestes característiques i propietats són de gran importància per a la funció i el paper del GLP-1 in vivo, i són aspectes clau per a la investigació i l'aplicació del GLP-1.
estabilitat:
GLP-1 té una forta sensibilitat redox i sensibilitat a la proteasa. En condicions fisiològiques, el GLP-1 sovint s'hidrolitzen ràpidament per proteases com la tripsina, perdent així la seva activitat biològica. A més, l'energia tèrmica, el pH, els ions metàl·lics i altres factors també afectaran l'estabilitat del GLP-1. Per tal de millorar l'estabilitat del GLP-1, els investigadors solen utilitzar diversos mètodes per millorar-lo, com ara la modificació química i l'ajust de l'estructura molecular.
Temps de deriva:
El GLP-1 (pèptid semblant al glucagó-1) és una hormona polipeptídica que es pot detectar i quantificar per espectrometria de masses. En la tecnologia de cromatografia líquida-espectrometria de masses (LC-MS), el temps de deriva del GLP-1 es refereix al temps que triguen els ions a derivar a causa de col·lisions en el camp elèctric i finalment arribar al detector. El temps de deriva es refereix al temps que les molècules en solució passen per la columna cromatogràfica, que pot reflectir la mida, la forma i l'estat de càrrega de les molècules. Per a molècules de pèptids com el GLP-1, el temps de deriva sol ser curt i es pot completar en qüestió de minuts.
El temps de deriva és un dels paràmetres d'anàlisi importants de la tecnologia d'espectrometria de masses, que es pot utilitzar per identificar la diferència entre diferents compostos i distingir isòmers, etc. Per a GLP-1, el temps de deriva es pot utilitzar per identificar la diferència entre això i altres pèptids o impureses, i s'utilitzen més per a l'anàlisi quantitativa.
En general, en l'espectrometria de masses LC-MS, el temps de deriva es veurà afectat per molts factors, com ara el tipus d'espectròmetre de masses, el mode d'ionització, el tipus de gas de col·lisió, la tensió, la temperatura, etc. Per tant, quan s'utilitza el temps de deriva com a base per a la identificació i quantificació, les condicions experimentals s'han d'optimitzar i estandarditzar per obtenir resultats reproduïbles.
El temps de deriva de GLP-1 fa referència al temps necessari perquè els seus ions arribin al detector a causa de la deriva en el camp elèctric, que es pot utilitzar com a paràmetre analític en la tecnologia LC-MS per identificar i quantificar pèptids i els seus isòmers cos, etc.
En resum, el GLP-1 és una petita molècula peptídica que és altament hidròfila i estable en entorns fisiològics, però també és susceptible a la sensibilitat redox i la sensibilitat a la proteasa. Entendre les propietats físiques del GLP-1 és de gran importància per al desenvolupament de nous fàrmacs GLP-1 i l'estudi de les seves activitats biològiques.